背景介紹
中性粒細胞是豐富的粒細胞類型，占人類所有白細胞的40%至70%。作為宿主抵抗入侵病原體的第一道防線，中性粒細胞具備固有的吞噬能力，可以吸收納米顆粒和吞噬死亡的紅細胞，并在激活后清除外來病原體和加載靶點；而且，還能跨血管遷移到臨近組織的能力。中性粒細胞是在瑞氏（Wright）染色血涂片中，胞質呈無色或極淺的淡紅色，有許多彌散分布的細小的（0.2～0.4微米）淺紅或淺紫色的*顆粒。細胞核呈桿狀或2～5分葉狀，葉與葉間有細絲相連。中性粒細胞具趨化作用、吞噬作用和殺菌作用。中性粒細胞來源于骨髓，具有分葉形或桿狀的核，胞漿內含有大量既不嗜堿也不嗜酸的中性細顆粒。這些顆粒多是溶酶體，內含髓過氧化酶、溶菌酶、堿性磷酸酶和酸性水解酶等豐富的酶類，與細胞的吞噬和消化功能有關。
圖1.中性粒細胞瑞氏
（Wright）染色圖片
注：紫色為中性粒細胞；粉色為紅細胞
產品介紹
作為天然免疫細胞的重要組成部分，中性粒細胞在多種疾病的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重要作用。為了進一步探討其作用機制，常需分離人及動物外周血中性粒細胞進行研究。
市售產品-中性粒細胞分離試劑盒的產品缺點
目前，市面上大多數(shù)中性粒細胞分離試劑盒主要是根據(jù)全血中各細胞密度不同的特點，通過密度梯度離心法獲取目的細胞。在實驗過程中多存在以下問題并在一定程度上影響了實驗結果：
1. 離心時紅細胞沉降不全面，多聚集于中性粒細胞白膜層，導致白膜層不清晰；
2. 增加離心時間或離心力后，可以部分改善紅細胞沉降結果，但仍能明顯看到紅細胞存在于白膜層或分離液中，且白膜層出現(xiàn)彌散；
3. 收集到的中性粒細胞層混有大量紅細胞，可使用紅細胞裂解液祛除紅細胞干擾，但花費時間較長且有可能影響中性粒細胞表面抗原的表達；
4. 獲取的細胞數(shù)量少且中性粒細胞純度低。
市售產品-中性粒細胞分離試劑盒的分離結果展示
圖2. 中性粒細胞分離試劑盒離心實際效果圖
（人中性粒細胞分離實驗為例）
注：中性粒細胞層有很多肉眼可見紅細胞污染
圖3. 中性粒細胞分離吉姆薩染色結果
（人中性粒細胞分離實驗為例）
注：中性粒細胞層經染色后涂片觀察，
圖片中紫色為中性粒細胞；
圖片中粉色為紅細胞
為了進一步優(yōu)化中性粒細胞分離效果，索萊寶研發(fā)了細胞分離專用的紅細胞沉降液（貨號R1000），采用新的“先沉降紅細胞，后進行細胞分離"的實驗方式，以較大程度降低紅細胞的污染，并且提高了中性粒細胞的純度及獲得量。
新品-中性粒細胞分離試劑盒的試劑組成
名稱 | 規(guī)格 | 保存 |
試劑A | 200ml | 常溫保存 |
試劑C | 100ml | 常溫保存 |
紅細胞沉降液 | 100ml | 常溫保存 |
細胞洗滌液 | 200ml | 常溫保存 |
新品-中性粒細胞分離試劑盒的產品優(yōu)勢
1. 同常規(guī)分離方案比，優(yōu)化后的方案雖然增加了沉降紅細胞的時間，但大大減少了離心時間且無需進行紅細胞裂解，故二者總用時差異不大；
2. 使用優(yōu)化方案離心后，離心管內中性粒細胞白環(huán)層較常規(guī)更加清晰且無紅細胞聚集；
3. 優(yōu)化后中性粒細胞的純度較常規(guī)有明顯提高。
新品-中性粒細胞分離試劑盒的分離結果展示
以人中性粒細胞分離試劑盒（P9402）為例說明
圖4. 紅細胞沉降液沉降及分離效果圖
圖5. 中性粒細胞分離試劑盒實際效果圖
注：中性粒細胞層幾乎沒有肉眼可見紅細胞污染
圖6. 中性粒細胞分離試劑盒染色結果
注：中性粒細胞層有極少紅細胞污染，
中性粒細胞純度可以到90%至95%。
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